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發(fā)布時間：2022-03-31 15:19:42 作者：知網(wǎng)小編 來源：www.derer.cn
熒光定量PCR檢測技術(shù)誕生至今已10多年的時間，而其應(yīng)用一直都沒廣泛展開，究其原因，無外乎受制于相關(guān)儀器、 試劑 和技術(shù)的發(fā)展。 近期，尤其是08年以來，儀器和試劑是遍地開花，這也使科研人員均躍躍欲試，都想借此技術(shù)使自己的研究能突飛猛進(jìn)，發(fā)展勢頭通過查找每年所發(fā)表的文章數(shù)可一目了然。
熒光定量PCR的應(yīng)用 分子生物學(xué)研究 1 核酸定量分析。 對傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測 , 比如近期流行的甲型H1N1流感， 轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi 基因失活率的檢測等。 2 基因表達(dá)差異分析。
答： 每個基因序列長短不一，有的好幾kb，有的幾百bp，但是我們在設(shè)計(jì)引物的時候只需要要求產(chǎn)物長度80-300bp，太短或者太長都不適合做熒光定量PCR檢測。 產(chǎn)物片段太短，無法跟引物二聚體區(qū)分，引物二聚體的長度大概在30-40bp，小于80bp很難區(qū)分是引物二聚體還是產(chǎn)物。
Real-time-PCR和 qPCR （Quantitative Rea-ltime-PCR ）是一碼事，都是實(shí)時定量PCR，指的是PCR過程中每個循環(huán)都有數(shù)據(jù)的實(shí)時記錄，因此可以對起始模板數(shù)量進(jìn)行精確的分析。 雖然Real-time PCR（實(shí)時熒光定量PCR）和 Reverse transcription PCR（反轉(zhuǎn)錄PCR）看起來都可以縮寫為RT-PCR，但是，國際上的約定俗成的是： RT-PCR特指反轉(zhuǎn)錄PCR ， 而Real-time PCR一般縮寫為 qPCR（quantitative real-time PCR）。
