胰蛋白酶檢測方法論文 胰蛋白酶活性測定的方法與步驟是什么？

發布時間：2023-09-13 14:35:52 作者：知網小編 來源：www.derer.cn

胰蛋白酶活性測定的方法與步驟是什么？

胰蛋白酶活性測定的方法與步驟. 在動物胰臟中，胰蛋白酶是以無活性的酶原狀態存在的。. 在生理條件下，胰蛋白酶原隨胰液分泌至十二指腸后，在小腸上腔有Ca2 的環境中，為腸 激酶 或胰蛋白酶所激活，其肽鏈N-端的賴氨酸與異亮氨酸之間的一個肽鍵被水解，失去一個酸性6肽，其 分子 構象發生一定的改變后轉變為具有催化 蛋白質 水解活性的胰蛋白酶。. 胰蛋白酶原 分子 量約為24000，其等電點為pH8.9;胰蛋白酶的分子量約為23400，其等電點為pH10.8。. 胰蛋白酶在pH3.0時最穩定，其濃溶液可貯存于冰箱 (0℃以下)數周而活性無顯著喪失。. pH<3時，胰蛋白酶易變性。. PH>5時，胰蛋白酶易自溶。.

胰蛋白酶的底物是什么？

以酪蛋白為底物，主要用于測定胰蛋白酶粗制品的活力。 胰蛋白酶催化水解底物酪蛋白生成不被三氯醋酸沉淀的 小分子 肽以及氨基酸。 在一定濃度范圍內，酶的水解濾液在波長275nm處光吸收的增值與胰蛋白酶的活力單位成正比。

胰蛋白酶溶解后如何處理？

經溶 解后，以極少量活性胰蛋白酶激活，使其酶原轉變為有活性 的胰蛋白酶（糜蛋白酶和彈性蛋白酶同時也被激活），被激 活的酶溶液再以鹽析分級的方法除去糜蛋白酶及彈性蛋白 酶等組分。 收集含胰蛋白酶的級分，并用結晶法進一步分離 純化。

胰蛋白酶的等電點是多少？

胰蛋白酶原的分子量約為24000，其等電點約為pH8.9，胰蛋白酶的分子量與其酶原接近（23300），其等電點約為 10 pH10.8，最適pH7.6～8.0，在pH=3 時最穩定，低于此pH 胰蛋白酶易變性，在pH>5 時易自溶。 Ca 2+離子對胰蛋白 酶有穩定作用。

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